p53蛋白是是一种抑癌基因，基于p53蛋白开发抗癌药物，也一直是肿瘤研究的关注点。例如p53蛋白在人鼻咽癌中的表达及其临床意义的研究，采用western印迹分析方法结合免疫沉淀技术，检测鼻咽活检组织p53蛋白表达。***终得出的结论是鼻咽癌p53蛋白的异常表达多见于恶性程度较高，分期较晚，TgA/VCA滴度高和TgA/EA阳性的病例，提示p53 基因在鼻咽癌中可能发挥一定的作用。 

p53蛋白是一种转录因子，在细胞处于应激状态时可被诱导表达，从而促进细胞进入细胞周期的停滞阶段，继而凋亡或者衰老，调控细胞代谢通路，调控与胚胎植入过程相关的细胞因子表达等。野生型P53基因具有抑癌作用，突变型P53基因则为致癌基因，P53基因结构改变及表达异常是人类肿瘤中常见的现象之一。

一些数据显示，p53蛋白简直就是生物学领域里的“大腕”，在PubMed中，有关p53蛋白的文章就超过了5万篇，而且这个数字目前仍然以每周数篇的速度稳定增长。毫无疑问，由TP53基因编码的p53蛋白是生物学领域中研究热度***高的蛋白。上海美迪西的生物部在体外生物学领域有丰富广泛的经验，通过酶水平测定、细胞水平测定、细胞生物学、生物化学、体外同位素测定、稳定细胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技术等，提供一套完整的生物学服务。

1、western印迹分析方法分析p53蛋白在人鼻咽癌中的表达步骤

（1）组织蛋白提取

标本来源于疑为鼻咽癌的初诊患者鼻咽纤维镜的检测标本，活体组织标本经病理检查确诊其中104例为鼻咽癌，8例为鼻咽粘膜慢性炎症。

活体组织取出后，在冰浴下用玻璃研磨器磨碎标本，然后加入细胞裂解液裂解细胞，超声波处理，离心，取上清，测总蛋白含量。

（2）免疫沉淀

用小鼠抗人p53单克隆抗体，根据抗体说明进行标本处理。p53抗体15μL与细胞裂解物1mL进行免疫沉淀。P53抗体是一种与Protein A Agarose 结合的小鼠抗p53单克隆抗体，可把裂解物中的p53抗原沉淀，形成抗原抗体复合物。P53靶蛋白沉淀后弃上清液，沉淀物经洗涤后加入强阴离子去污剂SDS加样缓冲液，使靶蛋白与抗体解离，然后用western印迹分析方法检出特异的p53蛋白。

（3）western印迹分析

已溶解与加样缓冲液的沉淀物进行SDS-PAGE（150g/L）电泳，电转移至硝酸纤维膜上，用1:30稀释p53抗体（小鼠抗人单克隆抗体），进行western blot,然后用1:300稀释的二抗（碱性磷酸酶偶联的抗小鼠IgG）处理，用DBA显色试剂盒检测、摄影。

检查结果发现，104例鼻咽癌活体组织中，12例出现p53蛋白表达异常条带，突变检出率为11.5%，8例鼻咽慢性炎症活检组织中p53蛋白表达未见异常。

2、为什么p53是一个重要的肿瘤抑制子

在癌症发展的过程中有两种重要的基因类型：癌基因和肿瘤抑制基因。当癌基因获得功能，比如通过突变时，其就会促进癌症发生，而关闭其功能的特殊药物常常能够用于多种类型癌症的治疗。从另一方面来讲，肿瘤抑制基因能够有效抵御肿瘤，但当其失去功能时，癌症就会继续发展。

p53蛋白是一种***重要的肿瘤抑制子，一方面p53在DNA出现损伤后能够引发细胞周期停滞或者消灭细胞，表明它可以通过预防致癌基因突变的累积来防止癌症发生。从这个角度来说，p53缺失会导致存活下来的子细胞中基因突变数目增多，从而间接地促进癌症的发生。另一方面，p53在致癌基因异常表达时能够阻止细胞增殖，表明它可能在***致癌基因突变的恶果方面也有重要作用。在这种情况下，p53缺失会允许表达致癌基因的细胞继续无***增殖，从而直接导致癌症发生。不管从哪个角度来说，p53都承担着基因组守护者的角色，它会***基因突变带来的有害后果。

研究表明编码p53的蛋白质会在40%的癌症类型中发生突变，而剩下的癌症类型则会频繁寻找其它方式来促进p53功能失活；来自科罗拉多大学癌症研究中心的科学家Matthew Galbraith博士表示，p53基因的失活或关闭p53蛋白的功能都是肿瘤发生的关键，人们通常会采用药物不断关闭p53的表达，但到目前为止效果并不明显。

因此，利用p53治疗癌症一直是挑战。已知p53基因有多个突变，有超过1，000个其他基因受p53状态的影响，这增大了寻找抑制肿瘤途径的难度。

癌症研究离不开基因研究，吉恩特公司生产的生物磁珠及磁珠法核酸提取试剂盒能够高通量自动化进行核酸提取与纯化，为肿瘤的相关研究提供了大量的技术支持。