细胞疗法已经成为生物医药研发的重要方向之一，浪潮之势席卷全球。但目前已问世的许多细胞疗法是自体细胞疗法，使用患者自身细胞，通过工程化改造后进行大规模培养，***终回输到患者体内。这种高度“个体化”的模式决定了一次生产只能用于一位患者的治疗，导致许多细胞疗法造价高昂，进一步***了患者的可及性。

与之不同的是，“理想型”的通用型细胞疗法（也称为现货型细胞疗法），一次生产可以治疗多位患者，通过规模化量产，有望大幅降低成本，在更加广泛的患者群体和疾病领域内应用。但在此之前，产业亟待突破细胞疗法规模化生产的局限，为通用型细胞疗法的未来做好准备。

成本高昂的质粒，不仅让细胞疗法的研发和生产成本居高不下，也带来放大复杂性和工艺稳定性的挑战。为此，产业界一直在寻找颠覆性的解决方案，期待摆脱现有载体生产工艺中对大量GMP质粒的依赖，以实现LVV生产规模大幅跃升，***大限度为提升通用型细胞疗法的可及性做好准备。

摆脱质粒依赖，LentiVV Stable释放生产潜力

药明生基全资子公司OXGENE自主开发的新一代病毒载体生产技术LentiVV Stable，巧妙地让稳定转染工艺与悬浮细胞系平台强强联手，在降低质粒成本的同时优化生产工艺，实现了LVV生产“降本”与“增效”的双目标。

LentiVV Stable与现有主流工艺明显的不同是，将GMP质粒的应用前置到了规模化生产之前。先在小规模情况下，应用质粒系统，培育出稳定的含有全部病毒包装所需质粒“配套生产设施”的“通用细胞工厂”，确保其可以稳定传代和扩增。这种技术被称为LentiVV Packaging Cell Line，定义为LentiVV Stable的1.0版本。LentiVV Packaging Cell Line扩增后仅需和含有目的基因的单一质粒反应，就可以生产定制化的LVV，从而避免了多质粒同时混合造成的随机性。

在此基础上，LentiVV Stable 2.0版本的LentiVV Producer Cell Line则更进一步，在“通用细胞工厂”内导入目的基因质粒，加装生产目标LVV的全套“一站式载体生产线”，稳定后的“生产细胞系”再进行规模化扩增，完全摆脱了质粒依赖，无需质粒转染就可以直接生产病毒载体，并且随着规模增加依然能够保持稳定。这是LentiVV Stable 2.0版本的LentiVV Producer Cell Line。

LentiVV Stable 1.0版本：将3个包装基因都插入生产细胞系中，整合构建出一个全新的细胞系，用于稳定表达生产目标病毒。该细胞系称为LentiVV Packaging Cell Line。

LentiVV Stable 2.0版本：在1.0基础上将GOI质粒也整合进入Packaging Cell Line基因组中。该细胞系称为LentiVV Producer Cell Line。

▲LentiVV Packaging Cell Line、LentiVV Producer Cell Line和四质粒转染系统对比

LentiVV Stable工艺能够大幅降低四质粒工艺中大规模生产阶段应用GMP质粒带来的工艺挑战和高昂成本。尤其值得一提的是，LentiVV Stable用到的HEK293（一种常用来表达外源基因的工具细胞）是悬浮细胞，不仅安全稳定，还能够突破现有主流工艺200L的局限，具备扩展到2000L乃至更大规模的潜力，为未来通用型细胞疗法的大规模上市铺平了道路。药明生基总裁兼***技术官David Chang博士表示：“目前，药明生基的LentiVV Stable已经取得里程碑式进展，产率***超过传统质粒工艺，正在进一步优化中，有望成为当下低成本、***率、规模化的LVV生产技术之一。”

片段筛选磁珠作为高通量测序中的关键原料，是影响整体实验结果的重要部分。如何对片段筛选磁珠进行稳定性的规模化生产，也是各类磁珠厂商要面临的问题。洛阳吉恩特生物科技有限公司作为生物磁珠的生产厂家，对片段筛选磁珠的关键工艺进行长期、大量的优化，通过在实际应用场景中的反复测试，目的片段筛选准确，尤其对于200-500bp的片段，筛选效果良好稳定，并且磁珠的磁响应速度快，可以在较短的时间内完成实验，筛选结果可直接进行下游环节。